1、問(wèn)題：如果樣品有背景顏色，如何進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如何判斷結(jié)果？
解答：將樣品留取100ml不加入酶底物法培養(yǎng)基做陰性對(duì)照，檢測(cè)結(jié)果只要比原樣品顏色深，即可認(rèn)為是陽(yáng)性。
2、問(wèn)題：比色盤(pán)如何保存，比色盤(pán)內(nèi)是否有生物存在？
解答：1）比色盤(pán)保存條件：2-30攝氏度避光保存
2）比色盤(pán)內(nèi)為緩沖物質(zhì)以及ONP和4-MU，并非微生物。
3、問(wèn)題：酶底物法培養(yǎng)基試劑的pH范圍是多少？
解答：酶底物法培養(yǎng)基的pH范圍是7.0-7.6
4、問(wèn)題：酶底物法培養(yǎng)基可以檢測(cè)的樣品的pH范圍是多少？
解答：酶底物法培養(yǎng)基可以檢測(cè)的樣品的pH范圍是4.5-10.5。
5、問(wèn)題：如何判斷酶底物法培養(yǎng)基試劑是否有效，應(yīng)該如何保存以及運(yùn)輸酶底物法培養(yǎng)基？
解答：1）保質(zhì)期內(nèi)的試劑應(yīng)該是白色或灰白色，能夠自由流動(dòng)的顆粒物
2）保存條件：2-30攝氏度避光保存
3）建議客戶放入自封袋然后避光保存
6、問(wèn)題：如果培養(yǎng)24小時(shí)，與比色盤(pán)相比，顏色不確定，如何判讀？
解答：24小時(shí)培養(yǎng)后，如果顏色不能確定，請(qǐng)繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)（注意不要超過(guò)28小時(shí)）然后對(duì)比顏色，如果顏色比比色盤(pán)淺，則為陰性。
7、問(wèn)題：封口過(guò)程中存在氣泡或者有的孔無(wú)液體是否影響結(jié)果判讀？
解答：不影響，酶底物法培養(yǎng)基檢測(cè)結(jié)果是經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析得到的。
8、問(wèn)題：酶底物法培養(yǎng)基試劑中是否含有有毒物質(zhì)？
解答：無(wú)毒
9、問(wèn)題：酶底物法培養(yǎng)基檢測(cè)限是多少？
解答：酶底物法培養(yǎng)基最低能檢測(cè)出的大腸菌群和大腸埃希氏菌數(shù)為1個(gè)/100mL。
10、問(wèn)題：陽(yáng)性比色盤(pán)的作用
解答：1）準(zhǔn)確判斷檢測(cè)結(jié)果
2）黃色大于等于陽(yáng)性比色盤(pán)視為總大腸菌群或糞大腸菌群陽(yáng)性
3）黃色或熒光大于等于陽(yáng)性比色盤(pán)視為大腸埃希氏菌陽(yáng)性
4）保質(zhì)期為12個(gè)月，注意更換
5）黑暗避光下保存
11、問(wèn)題：酶底物法培養(yǎng)基檢測(cè)原理
解答：1）酶底物法培養(yǎng)基同時(shí)檢測(cè)總大腸菌群或糞大腸菌群和大腸埃希氏菌。其中兩種營(yíng)養(yǎng)指示劑ONPG和MUG是酶底物法培養(yǎng)基試劑的主要成分。它們分別可以被大腸菌群的β-半乳糖苷酶和大腸埃希氏菌的β-葡糖醛酸梅分解代謝。
2）如果總大腸菌群或糞大腸菌群利用酶底物法培養(yǎng)基試劑生長(zhǎng)，它們的β-半乳糖苷酶就會(huì)分解代謝ONPG，使樣品從無(wú)色變?yōu)辄S色。
3）大腸埃希氏菌利用其β-葡糖醛酸酶分解代謝MUG產(chǎn)生熒光。因?yàn)榇蠖鄶?shù)的非目標(biāo)菌都不含有這種酶，所以它們不會(huì)生長(zhǎng)或造成干擾。
4）極少量的可以產(chǎn)生這種酶的非目標(biāo)菌，也會(huì)被酶底物法培養(yǎng)基試劑特殊配方的抑制劑選擇性的抑制生長(zhǎng)。
12、問(wèn)題：各菌種之間的關(guān)系
解答：總大腸菌群＞糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）＞大腸埃希氏菌（大腸桿菌）
13、問(wèn)題：機(jī)器出廠時(shí)顯示屏上顯示的數(shù)字為何不是零
解答：因?yàn)闄C(jī)器出廠時(shí)工人師傅為了保證機(jī)器質(zhì)量，會(huì)使用定量盤(pán)來(lái)回測(cè)試機(jī)器。所以計(jì)數(shù)結(jié)果初始值不為零。
14、問(wèn)題：定量瓶里的顆粒物是什么？
解答：定量瓶里的顆粒物是硫代硫酸鈉。
15、問(wèn)題：如果取樣瓶中的硫代硫酸鈉為液滴狀而不是粉末狀，是否說(shuō)明取樣瓶被污染？
解答：不能。硫代硫酸鈉是易熔的，它的熔點(diǎn)較低（熔點(diǎn)48℃或118°F）。如果發(fā)現(xiàn)取樣瓶中的硫代硫酸鈉為液滴狀，可能是因?yàn)檫\(yùn)輸中溫度升高導(dǎo)致其熔解。但是無(wú)論是液態(tài)的硫代硫酸鈉還是粉末狀的硫代硫酸鈉，其化學(xué)本質(zhì)未發(fā)生變化。這樣的取樣瓶仍然是無(wú)菌的，此情況不影響產(chǎn)品的性能。
16、問(wèn)題：取樣瓶中的硫代硫酸鈉含量是多少？如果樣品中余氯含量超出檢測(cè)范圍，應(yīng)如何操作？
解答：取樣瓶中硫代硫酸鈉為10-35mg可以中和15mg/L的余氯
17、問(wèn)題：如何進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)？
解答：1）同一水樣
2）同一稀釋倍數(shù)
3）單一因素
4）最小樣本量30組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析
18、問(wèn)題：如何處理陽(yáng)性樣品？
解答：采用耐高溫處理垃圾袋進(jìn)行高壓滅菌后丟棄即可。操作步驟如下：
1）將陽(yáng)性的定量盤(pán)放入垃圾袋中，每袋可放入30個(gè)盤(pán)子。
2）將垃圾袋扎好（不能密封）。
3）放入高溫高壓滅菌鍋處理即可。
19、問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)中對(duì)同一樣品選擇了多個(gè)稀釋度，如何選擇合適的稀釋度？
解答：對(duì)于未知水樣，進(jìn)行了多個(gè)梯度的稀釋一般情況2-3個(gè)，并進(jìn)行檢測(cè)，選擇結(jié)果在30-300MPN的稀釋度。
1）不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法
a、首先選擇平均菌落數(shù)在30-300之間者進(jìn)行計(jì)算，若具有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見(jiàn)表1中實(shí)例1）
b、若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30-300之間，則視二者之比值來(lái)決定，若其比值小于2應(yīng)報(bào)告兩者的平均數(shù)（如表1中實(shí)例2）。若大于2則報(bào)告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)（如表1中實(shí)例3）。若等于2亦報(bào)告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)（見(jiàn)表1中實(shí)例4）。
c、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（如表1中實(shí)例5）
d、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（如表1中實(shí)例6）
e、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30-300之間，則應(yīng)以最接近30或300的平均菌落數(shù)稀乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（如表1中實(shí)例7）
f、若所有稀釋度的平板上均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以未檢出報(bào)告之。
備注：以上結(jié)果報(bào)告方法詳見(jiàn)GB/T5750.12-2006。
